首先制作优质母种,同时制备母种培养基。然后将母种放入培养室内,待菌丝长满培养基斜面后,就能用来接原种了。接着制作原种,并同时制备培养基,当培养基冷却至室温时进行接种,一般经20-25天后便能长满瓶子。最后制作栽培种,等其长满瓶壁后即可播种。
1、母种培养基配方:马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂ZO克,磷酸二氢钾1克,硫酸镁0.50克,水1000毫升PH值5.50~6.50。
接种培养:按常规法接种后将母种放入培养室内,温度23~25℃,空气相对湿度65%左右培养7~10天,菌丝长满培养基斜面,即可用来接原种。
2、原种配方:小麦(玉米):95%;石膏粉:2O%过磷酸钙:2O%;尿素:0.50%;白糖:0.50%;pH值:5.50~6.50。2.1.2籽壳:87%;麸皮:10%;蔗糖白糖:0.50%;石膏粉:1%;过磷酸钙:1%;尿素:0.50%;加水120%~130%。
接种培养:A菌的培养基出锅冷却至室温时进行接种,每只试管可接5~6瓶原种。培养条件同母种,一般经20~25天即可长满瓶子。注意:酒瓶培养到10~12天需摇瓶,然后再培养。优质原种的特征是菌丝洁白、整齐,瓶壁及表面布满菌丝,有菇香味。
3、栽培种的制作
接种培养:首先用75%酒精或3%来苏儿擦手及原种瓶外消毒,然后用消毒的接种铲(锄*翻松原种,在接种箱内(超净工作台上)的酒精灯火焰上方倒少许原种于灭菌的瓶料中,每瓶原种接20~25瓶,培养条件同原种。一般20~25天即可长满,长满后应立即播种。若暂时不用,可在10~14摄氏度下干燥保存,时间不超过10天;2~4摄氏度时保存不超过20天。经低温保存的栽培种,在使用前将菌种放在常温下恢复1~2天。