回答1、常用配方:去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂10-20g、水1000ml。2、制作方法:将马铃薯去皮洗净,切成小块煮至熟而不烂,过滤加水至1000ml;将琼脂剪成小段,放入锅内,边搅边煮,溶化后加入葡萄糖;装管前取一小勺浮在凉水中冷却观察其硬度适合然后分袋试管,用棉花塞塞住试管口,进行灭菌;采用组织分离法,通常是从食用菌子实体内部分离纯菌种;经过10天左右菌丝长满瓶,母种即制作成功。
一、怎样制作菌种母种
1、母种,又称为一级种,用直径18-22cm的试管制备。常用配方:去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂10-20g、水1000ml。
2、制作方法:
(1)将马铃薯挖去虫眼,去皮洗净,切成小块煮至熟而不烂,过滤加水至1000ml。
(2)将琼脂剪成小段,放入锅内,边搅边煮,待琼脂溶化后加入葡萄糖。
(3)由于琼脂品质各有不同加入份量要根据实际情况而定,装管前取一小勺浮在凉水中冷却观察其硬度适合然后分袋试管,用棉花塞塞住试管口,放入小高压锅内灭菌,当压力表达到1.5个压力时,再灭菌30分钟。让其自然冷却,取出放置在接种箱中备用。
(4)采用组织分离法,通常是从食用菌子实体内部分离纯菌种,操作时,从子实体内切取一小块组织,放在培养基中培养可长出纯菌种,且菌丝萌发快,遗传性状稳定,后代不易发生变异。
(5)取出试管放成斜面,放置2-3天后,无杂菌感染再放入接种箱内接种,接了种的试管放入培养室内进行培养,温度要求25℃左右,相对湿度75%以下。发现污染及时挑出,经过10天左右菌丝长满瓶,母种即制作成功。
二、菌种如何脱毒
1、菌种的脱毒,一般可借鉴植物的脱毒技术。所谓植物脱毒,是将植物茎尖生长尖端组织进行分离,将分离组织置于特定培养基中进行培养,从而获得脱离原体病毒、病菌的新生种苗。具体的脱毒方法有菌丝尖端脱毒法、原基组织脱毒法等。脱毒菌种恢复了菌种原有的生物特性,使菌种的抗性得到了增强,抗病力得到了提高。
2、菌丝尖端脱毒法,一般使用规格为90mm或110mm的培养皿,无此规格培养皿时,可改用规格为25mm*200mm的大型试管,但操作不太方便。原基组织脱毒技术,最大程度革除了原有组织分离时子实体处于生长中后期携带病毒、病菌可能性极大等弊端,真正实现了分离尖端组织脱毒的目的。