当前位置: 首页 » 农业技术 » 种植技术 » 正文

甘油菌菌种活化步骤,甘油菌怎么保存

放大字体  缩小字体 发布日期:2024-11-22 10:26  浏览次数:4778
内容摘要:1、LB培养基制备:准备10g胰蛋白胨,5g酵母提取物,10g氯化钠,加入800ml去离子水,拌匀,直至完全溶解,然后用0.2ml氢氧化钠(5mol/L)将ph调节到7.4,并加入1L去离子水,高压蒸汽灭菌。2、倒平板:培养基放置在60℃水浴锅中保温,取出后,轻轻转动培养基,让琼脂分布均匀。一、甘油菌菌种活化步骤1、LB培养基制备(1)准备10g胰蛋白胨,5g酵母提取物,10g氯化钠,然后加入800ml去离子水,搅拌均匀,直至完全溶解,接着使用0.2ml的氢氧化钠(5mol/L)将ph调节到7.4左右,并

甘油菌菌种活化步骤,甘油菌怎么保存

回答1、LB培养基制备:准备10g胰蛋白胨,5g酵母提取物,10g氯化钠,加入800ml去离子水,拌匀,直至完全溶解,然后用0.2ml氢氧化钠(5mol/L)将ph调节到7.4,并加入1L去离子水,高压蒸汽灭菌。2、倒平板:培养基放置在60℃水浴锅中保温,取出后,轻轻转动培养基,让琼脂分布均匀。

一、甘油菌菌种活化步骤

1、LB培养基制备

(1)准备10g胰蛋白胨,5g酵母提取物,10g氯化钠,然后加入800ml去离子水,搅拌均匀,直至完全溶解,接着使用0.2ml的氢氧化钠(5mol/L)将ph调节到7.4左右,并加入1L的去离子水,高压蒸汽灭菌20分钟左右。

(2)在高压灭菌之前,应当加入15g/L(铺制平板用)或7g/L(配制顶层琼脂糖用)的琼脂糖。

2、倒平板

(1)超净台、接种环、培养皿,酒精灯等用紫外线灭菌30分钟左右。

(2)高压灭菌后的培养基放置在60℃的水浴锅中保温,等到溶液尚未冷却的时候,将培养基取出,轻轻转动,让琼脂均匀分布在培养基溶液中。

(3)等到冷却至50℃的时候,在超净台中加入抗生素,并旋转将培养基混合均匀,然后从烧瓶中倾出培养基铺制平板。

(4)将甘油菌冻存管放在冰上,直接用接种环在冻存管内的冰渣上蘸一下,然后涂上平板。

3、大量培养

(1)将冷藏的液态培养基重新高温高压灭菌,等到冷却至50℃的时候,加入抗生素,接着将菌落挑至已经加入抗生素的液态培养基中(2-5ml),37℃,200rpm培养8小时左右。

(2)按照1:500-1000的比例,将添加了抗生素的液态LB培养基稀释上一步骤所得菌液(20-25μL菌液+25ml液态LB培养基),37℃,200rpm培养12-16小时。

二、甘油菌怎么保存

1、如果是20%甘油保存菌种(甘油:菌液=20:80),一般放置在零下70℃的环境下保藏。

2、如果是一般细菌的菌种,在纯化后,接种在普通肉汤管中,然后经过4-6小时增菌后,放入适量甘油-生理盐水保存液,在零下20℃的环境下进行保藏。如果是链球菌属和奈瑟氏菌属的菌种,在纯化后,接种在血清肉汤管中,在5-10%CO2中经过8-10小时增菌后,加入适量甘油-生理盐水保存液,放置在零下80℃的环境下进行保藏。如果是真菌菌种,在纯化后,直接取菌洗入肉汤,加入甘油-生理盐水保存液,放置在零下20℃的环境下进行保藏。

农村网  责任编辑:农村网
 

      温馨提示:您正在浏览的文章是“甘油菌菌种活化步骤,甘油菌怎么保存”
      原载地址:https://www.nongcun5.com/jishu/40963.html
      版权声明:本网站刊载的资讯由网友提供分享,资讯内容纯属作者个人观点,不表示农村网同意其说法或描述,仅为提供更多信息,也不构成任何建议。网友转载请注明原作者姓名及出处。如有侵犯到您的版权,请与我们联系。对于农村网的原创作品,受国家知识产权保护,版权属于农村网所有。转载务必注明出处及作者。凡用于商业用途需征得书面同意,否则追究法律责任。
 
关键词: 甘油菌
 
[ 农业技术搜索 ]  [ 加入收藏 ]  [ 告诉好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 关闭窗口 ]

 
 
推荐图文
推荐农业技术
    点击排行
     
    网站首页 | 关于我们 | 联系方式 | 使用协议 | 版权隐私 | 帮助中心 | 网站地图 | 网站留言 | RSS订阅
    工信部信软〔2015〕440号   农市发[2016]2号   国发〔2015〕40号   农发〔2017〕1号   中央一号文件